一、细胞基本属性
细胞名称
人横纹肌肉瘤细胞(RD细胞)
细胞别称
RD细胞;横纹肌肉瘤细胞;软组织肉瘤细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
来源于横纹肌肉瘤患者(临床病理信息明确,供体匿名化处理)
组织来源
横纹肌肉瘤组织(原发灶或转移灶分离)
生长特性
贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态
梭形或多角形,部分区域呈融合性片状分布
细胞代数
P4 - P10(经STR鉴定确认遗传稳定性)
细胞规格
1×10^6 cells/T75培养瓶 或1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
培养基
DMEM高糖培养基(含10% FBS + 1%双抗)
培养条件
气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
程序降温冻存液(含10% DMSO及胎牛血清),液氮长期保存
倍增时间
约36 - 48小时(与传代密度及血清浓度相关)
供应限制
仅限于基础研究,禁止用于药物筛选或商业用途
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴解冻后离心去冻存液,加入预温培养基重悬
培养瓶:酒精消毒表面后直接置于CO₂培养箱,4小时后首次换液
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例
1:3至1:5(推荐初始密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法
使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.02% EDTA)
37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
避免长时间消化(防止细胞膜完整性受损)
传代后12小时内避免移动培养瓶以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
胎牛血清冻存液(含10% DMSO及营养添加剂)
细胞密度
冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
冻存步骤
消化离心后缓慢加入预冷冻存液混匀
程序降温:4℃平衡30分钟 → - 80℃过夜 → 转移至液氮气相
复苏验证
复苏后48小时检测贴壁率(标准≥85%)
功能验证:MyoD1蛋白免疫荧光染色(P5代细胞应保持肌源性分化潜能)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度记录异常导致细胞团碎裂(需提供物流温度曲线)
2. 7日内经qPCR证实交叉污染(需提供STR比对报告)
3. 复苏后贴壁率低于80%(需提供相差显微镜影像)
4. 细胞形态学特征与描述不符
不予重发情形
1. 未使用建议胶原包被导致贴壁失败
2. 自行更换培养基成分引发细胞分化
3. 超代次使用(P10以上)导致功能异常
4. 未按要求进行定期支原体检测