一、细胞基本属性
- 细胞名称:RBE人肝胆管癌细胞
- 细胞别称:RBE细胞;肝胆管癌细胞;胆管上皮癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:肝胆管癌组织
- 生长特性:贴壁生长(需含特定细胞外基质的培养表面)
- 细胞形态:不规则多边形或梭形,单层贴壁生长
- 细胞代数:P3 - P8(推荐使用代数,确保基因组稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗+特定生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(依赖培养密度与传代处理)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒,静置于培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液
- 37℃消化30 - 60秒,轻柔拍打至细胞脱落
- 注意事项:
- 避免消化过度导致细胞膜损伤
- 传代后6 - 8小时补充新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:细胞迁移实验(P5代细胞应保持侵袭特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
- 复苏存活率低于85%
- STR基因分型与存档数据不符
- 不予重发情形:
- 收货后超48小时未进行复苏操作
- 使用非指定培养基或血清培养
- 未按规范进行细胞传代导致污染
- 未提供完整污染检测证据即提出索赔