一、细胞基本属性
- 细胞名称:QSG - 7701人正常肝细胞(Human Normal Liver Cells)
- 细胞别称:人肝细胞;正常肝细胞系;肝实质细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体经肝功能及病毒学筛查)
- 组织来源:正常肝组织(手术切除健康边缘组织)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:上皮样单层,细胞边界清晰,核质比适中
- 细胞代数:P5 - P12(推荐使用代数,确保肝特异性功能表达)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗+肝细胞生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存(- 196℃)
- 倍增时间:~36 - 48小时(依赖培养条件及传代密度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,置于37℃培养箱平衡4小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:
- 消化后需完全中和胰酶(残留酶影响贴壁)
- 传代后12小时内避免频繁观察,减少扰动
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及营养保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞,缓慢滴加冻存液重悬
- 梯度降温程序:4℃ 30min → - 20℃ 1h → - 80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证:
- 复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:白蛋白分泌检测(P8代细胞分泌量≥5μg/10⁶ cells/24h)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 到货3日内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%(需提供染色结果及显微照片)
- 细胞STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 收货后未按规范立即复苏(超过48小时未处理)
- 自行修改培养基成分导致功能异常
- 实验操作污染未及时反馈(超过7个工作日)
- 未按说明书进行预包被处理导致贴壁失败
(注:所有数据基于标准实验条件,实际应用需根据具体研究需求优化参数。)