一、细胞基本属性
- 细胞名称：PLC/PRF/5人肝癌细胞
- 细胞别称：PLC/PRF5；人肝癌细胞系
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 来源背景：源自成年男性原发性肝细胞癌组织
- 组织来源：肝癌组织（经病理学验证）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：上皮样单层贴壁，细胞边界清晰，核质比高
- 细胞代数：P5 - P10（确保功能稳定性与遗传背景一致性）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640培养基（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 72小时（受培养密度及传代操作影响）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或生物医药产品开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于5mL预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面后直接置于培养箱静置4小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：
- 消化后需完全中和胰酶（残留酶影响贴壁）
- 传代后6小时内避免移动培养瓶以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及葡萄糖缓冲体系）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，轻柔重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：甲胎蛋白（AFP）分泌能力检测（P5代细胞应维持特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内证实支原体污染（需提供荧光定量PCR结果）
- 细胞复苏存活率低于90%
- STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形：
- 超时复苏（收货后超过72小时未处理）
- 自行更换培养基导致细胞状态异常
- 未按规范传代（如过度消化或接种密度过低）
- 未定期进行支原体监测引发污染扩散
