一、细胞基本属性
细胞名称:PC-9人肺癌细胞
细胞别称:人肺腺癌细胞系PC-9
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:24岁男性肺腺癌患者(无吸烟史,携带EGFR exon19缺失突变)
组织来源:肺腺癌组织原代分离
生长特性:贴壁生长(需胶原包被培养器皿)
细胞形态:上皮样多边形,核质比高,贴壁紧密
细胞代数:P3 - P10(推荐使用代数,确保基因组稳定性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:胎牛血清冻存液(含10% DMSO),液氮气相长期保存
倍增时间:约24 - 48小时(与EGFR信号通路活性相关)
供应限制:仅限肿瘤机制研究,禁止临床治疗或转基因操作
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
培养瓶:表面消毒后直接置于CO₂培养箱静置4小时
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含酚红指示剂)
37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
传代后需12小时内首次换液(清除凋亡细胞)
维持培养基pH 7.2 - 7.4(酸性环境易诱发细胞分化)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:90% FBS+10% DMSO
细胞密度:冻存浓度5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤:
消化后离心收集高活力细胞
程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期储存
复苏验证:
复苏后48小时进行CCK - 8增殖检测(存活率≥85%)
突变位点验证:每季度通过Sanger测序确认EGFR exon19缺失
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 液氮运输罐温度记录异常(需提供温度监测曲线)
2. 收到后72小时内证实交叉污染(需STR匹配报告)
3. 复苏后EGFR敏感性与存档数据偏差>20%
4. 细胞贴壁率<70%(需提供相差显微镜图像)
不予重发情形:
1. 使用非指定培养基导致EGFR表达异常
2. 未定期进行支原体检测引发实验污染
3. 擅自进行基因编辑操作影响细胞特性
4. 培养箱CO₂浓度波动超过±2%持续48小时
(注:所有数据基于本实验室标准操作流程,实际培养结果可能因操作差异略有波动,建议建立用户自身实验基线参数。)