一、细胞基本属性
- 细胞名称:Panc 05.04人胰腺癌上皮细胞
- 细胞别称:胰腺导管腺癌细胞;PANC - 05.04细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 疾病背景:源自胰腺导管腺癌组织,保留肿瘤上皮特性
- 组织来源:胰腺癌原发灶组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或特定基质涂层)
- 细胞形态:上皮样多角形,单层贴壁,核质比高
- 细胞代数:P5 - P10(建议使用中低代数以维持遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640(含10% FBS + 1%青霉素/链霉素+ 1%丙酮酸钠)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存(- 150℃以下)
- 增殖特性:倍增时间约48 - 60小时(依赖培养密度及微环境)
- 应用限制:仅限体外研究,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭表面,静置培养箱平衡4小时后换液
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐初始接种密度3×10^4 cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落,镜下确认后终止
- 注意事项
- 避免过度消化导致细胞膜损伤(建议预铺基质涂层)
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及营养保护剂)
- 冻存密度:1×10^6 cells/mL至2×10^6 cells/mL
- 冻存流程
- 离心收集细胞,重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮储存
- 复苏验证
- 复苏后48小时内检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:CCK - 8增殖实验(P5代细胞应保持活跃增殖能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 72小时内经检测证实微生物污染(需提供污染检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色结果)
- STR分型与数据库记录不符
- 免责情形
- 收货后未及时处理(超过48小时未复苏)
- 使用非指定培养基或培养条件导致状态异常
- 自行改造细胞或反复冻融操作
- 未按规范进行细胞鉴定即开展实验