一、细胞基本属性
- 细胞名称:人胰腺癌细胞(Human Pancreatic Carcinoma Cells)
- 细胞别称:Panc 03.27细胞;胰腺导管腺癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:胰腺癌组织(原代分离自胰腺导管腺癌患者手术样本)
- 生长特性:贴壁生长(部分细胞呈半悬浮聚集倾向)
- 细胞形态:不规则上皮样或纺锤形,核质比高,可见伪足结构
- 细胞代数:P3 - P8(经STR鉴定确保遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(依赖细胞密度及传代处理方式)
- 供应限制:仅限科学研究,不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒后静置培养箱4小时再观察贴壁情况
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(贴壁细胞需及时传代防止过度生长)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐初始密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞完全脱落
- 注意事项:
- 消化终止需立即加入含血清培养基中和
- 半悬浮细胞需离心后去除上清再重悬接种
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及糖原保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集对数生长期细胞,重悬于冻存液分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时内检测细胞活力(台盼蓝染色存活率≥85%)
- 功能验证:CCK - 8法检测增殖曲线(P5代细胞应保持对数生长特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供温度记录证明)
- 到货7天内检测出支原体污染(需提供第三方检测报告)
- STR分型与数据库信息不匹配(需提供完整电泳图谱)
- 不予重发情形:
- 未按说明书要求进行预培养直接冻存
- 使用非指定培养基导致细胞形态异常
- 未定期进行支原体检测造成污染扩散
- 接种密度低于推荐值引发生长停滞