一、细胞基本属性
细胞名称
P53R [JHU-56]人结直肠癌细胞
细胞别称
JHU-56细胞；结直肠腺癌细胞
种属来源
人（Homo sapiens）
生物学背景
源自结直肠腺癌组织，经基因工程改造稳定表达突变型p53蛋白，适用于肿瘤耐药性及信号通路研究。
组织来源
结直肠癌原发灶（经病理学确诊为腺癌）
生长特性
贴壁生长（需胶原包被培养器皿）
细胞形态
不规则多角形，核质比高，常见重叠生长
细胞代数
P5 - P15（建议传代不超过20代以维持基因稳定性）
细胞规格
1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管（含血清替代型冻存液）
培养基
RPMI - 1640（含10%胎牛血清+1%双抗+2mM L - 谷氨酰胺）
培养条件
气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
程序降温冻存液（含10% DMSO+血清替代物），液氮气相长期保存
增殖特性
倍增时间约36 - 48小时（受p53突变影响增殖速率波动）
应用限制
仅限于肿瘤生物学基础研究，禁止体内移植或临床诊断
二、细胞培养操作指南
复苏操作
冻存管37℃水浴解冻后，离心去除冻存液，重悬接种于预铺胶原的培养瓶。
传代标准
融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
传代比例
1:3至1:5（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
消化方法
使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液，37℃消化2 - 3分钟，离心后完全去除消化终止液。
关键注意
1. 胶原包被培养瓶可提高贴壁效率
2. 传代后12小时避免移动培养瓶防止悬浮细胞脱落
3. 定期检测p53蛋白表达水平（建议每5代验证一次）
三、细胞冻存操作规范
冻存液组成
无血清冻存液（含10% DMSO+90%胎牛血清）
冻存密度
1×10⁶ cells/mL至2×10⁶ cells/mL
冻存程序
梯度降温：室温→4℃（30分钟）→ - 20℃（2小时）→ - 80℃（12小时）→液氮储存
质检标准
1. 复苏存活率≥85%（台盼蓝染色法）
2. p53突变位点PCR验证（每批次提供检测报告）
3. 裸鼠成瘤实验备案数据（可选附加服务）
四、售后服务承诺
重发承诺
1. 到货72小时内细胞贴壁率＜70%（需提供相差显微镜影像）
2. 支原体污染阳性（需第三方检测报告）
3. STR分型与数据库不匹配（提供8位点比对结果）
免责声明
1. 客户自行更换培养基导致表型改变
2. 未使用胶原包被造成的贴壁失败
3. 超过建议代数引发的基因漂移
4. 液氮储存设备故障导致的冻存管破裂
