一、细胞基本属性
- 细胞名称:OVCAR-3人卵巢腺癌细胞
- 细胞别称:OVCAR3;卵巢癌细胞系OVCAR-3
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 疾病背景:源自60岁女性卵巢腺癌患者的恶性腹水样本
- 组织来源:卵巢腺癌组织
- 生长特性:贴壁生长(需胶原包被培养器皿)
- 细胞形态:上皮样,多角形或梭形,核质比高
- 细胞代数:P5 - P10(建议使用前代次以保证遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%丙酮酸钠+10μg/mL胰岛素)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养基成分及传代密度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶:酒精消毒外表面,静置培养箱4小时待细胞贴壁
- 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每3 - 4天传代)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化3 - 5分钟至细胞间隙增大
- 注意事项:避免机械吹打过度损伤细胞,传代后48小时内避免换液
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及40%基础培养基)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10^6 - 5×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:离心收集细胞,重悬于冻存液后分装至冻存管;梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃ 24小时 → 液氮保存
- 复苏验证:复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥85%);功能验证:CCK - 8检测增殖曲线(P8代细胞应维持对数生长特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录);2. 到货3日内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测证据);3. 细胞存活率低于85%(按规范复苏检测);4. STR图谱与ATCC标准不符
- 不予重发情形:1. 使用非推荐胶原包被培养器皿导致贴壁失败;2. 未按时传代引发细胞老化或自发分化;3. 实验操作污染(如未在超净台操作);4. 未进行STR鉴定直接用于实验