一、细胞基本属性
细胞名称:OS - RC - 2人肾癌细胞
细胞别称:人肾透明细胞腺癌细胞;肾癌细胞系OS - RC - 2
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年患者(原代取自肾癌组织,临床信息保密)
组织来源:肾透明细胞癌组织
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:不规则多边形,核质比高,可见癌性伪足
细胞代数:P4 - P10(推荐使用代数,确保增殖活性稳定)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:RPMI - 1640+10% FBS+1%丙酮酸钠+10mM HEPES
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO+胎牛血清替代物),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与传代密度及培养基批次相关)
供应限制:仅用于肿瘤机制研究,禁止体内移植或商业用途
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后,900rpm离心3分钟,去上清并重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭外表面,静置于培养箱4小时恢复代谢
传代标准:融合度达80% - 90%(高密度易触发接触抑制失效)
传代比例:1:3至1:5(建议接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
- 预冷PBS清洗后,使用0.25%胰酶+0.02% EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
- 消化终止需添加含血清培养基(体积≥3倍消化液)
- 避免频繁换液(每周2 - 3次,每次换液量≤50%)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:90%完全培养基+10% DMSO(现配现用)
细胞密度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL(高密度提升复苏效率)
冻存步骤:
- 4℃预冷冻存管,分装后立即置于程序降温盒(-1℃/min)
- 梯度保存:-80℃过夜后转入液氮气相层
复苏验证:
- 存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:CCK - 8检测48小时增殖曲线应符合标准斜率
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 干冰耗尽导致运输温度>-60℃(需提供物流温度记录)
2. 72小时内证实真菌/支原体污染(需第三方检测报告)
3. 细胞复苏存活率<80%(需提供染色视频记录)
4. STR分型与ATCC数据库偏离(需提供电泳图谱)
不予重发情形:
1. 使用非指定培养基(如DMEM/F12或低血清条件)
2. 未按规范进行胶原包直接接种
3. 传代次数超过P10后出现衰老特征
4. 未定期进行核型分析导致遗传漂移
(注:本简介基于标准操作编写,实际培养需结合实验室条件优化参数。)