一、细胞基本属性
细胞名称:人食管癌细胞(Human Esophageal Carcinoma Cells)
细胞别称:OE19;食管腺癌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年患者(具体年龄及性别信息保密)
组织来源:食管腺癌组织
生长特性:贴壁生长(依赖基质胶包被培养器皿)
细胞形态:不规则多边形,核质比高,可见重叠生长
细胞代数:P4 - P10(建议使用前5代以保证遗传稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO),-150℃以下长期保存
倍增时间:约48 - 60小时(依赖培养基成分及传代密度)
供应限制:仅限肿瘤机制研究,不可用于临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解震,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:表面消毒后直接入箱静置4小时再换液
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,及时加入含血清培养基终止
注意事项:
- 避免细胞过度融合(可能诱发自发分化)
- 传代后48小时内避免频繁移动培养器皿
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:含血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 消化后离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期存储
复苏验证:
- 复苏后48小时检测贴壁率(应≥85%)
- 功能验证:CCK - 8增殖曲线检测(P5代细胞应保持高增殖活性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流温度记录异常导致细胞团块溶解(需提供温度记录截图)
2. 到货72小时内证实交叉污染(需提供STR比对报告)
3. 复苏后活率低于85%(需提供台盼蓝染色视频)
4. 细胞形态学特征与描述不符
不予重发情形:
1. 未使用指定基质胶进行培养
2. 自行修改培养基关键成分导致异常
3. 解冻后未及时换液引发污染
4. 未进行STR鉴定直接用于论文发表
注:所有操作需在二级生物安全柜内完成,建议定期进行支原体检测及核型分析。