一、细胞基本属性
- 细胞名称:人弥漫大B细胞淋巴瘤细胞(OCI - LY3)
- 细胞别称:OCI - LY3;弥漫大B细胞淋巴瘤细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 疾病背景:源自复发弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者胸水样本
- 组织来源:活化B细胞亚型淋巴瘤组织
- 生长特性:悬浮聚团生长(部分贴壁依赖微环境)
- 细胞形态:不规则圆形或类淋巴母细胞样,胞体透亮
- 细胞代数:P5 - P15(建议使用前10代以保持遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI 1640培养基(含10% - 20%FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5%CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10%DMSO及蛋白保护剂),-150℃液氮长期保存
- 倍增时间:约24 - 36小时(依赖细胞密度与血清浓度)
- 供应限制:仅供肿瘤机制研究,不可用于临床治疗或基因编辑实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后转移至15mL离心管,加5mL培养基离心去冻存液。
- 培养瓶:显微镜观察细胞聚团状态,静置培养箱4小时后再换液。
- 传代标准:细胞密度达1×10^6 cells/mL或培养基明显酸化(pH<6.8)
- 传代比例:1:3至1:5(推荐初始密度2×10^5 cells/mL)
- 传代方法:轻柔吹打分散细胞团,离心后重悬于新鲜培养基
- 注意事项:
- 避免剧烈震荡导致细胞膜损伤。
- 维持培养基pH>7.0以防止自发凋亡。
- 定期检测支原体(建议每3代检测)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10%DMSO+20%FBS)
- 冻存密度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤:离心收集细胞后缓慢逐滴加入冻存液;程序降温:4℃30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证:复苏后48小时检测活率(台盼蓝染色≥85%);功能性验证:CCK8检测增殖曲线(P5代应保持对数生长期特性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 1. 运输过程温度记录异常(需提供温度追踪记录)
- 2. 到货72小时内经PCR证实支原体污染
- 3. 活率检测低于85%(需提供台盼蓝染色视频)
- 4. STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 1. 使用非推荐培养基培养超过2代
- 2. 未按时传代导致细胞过度酸化
- 3. 未执行推荐复苏流程引发冰晶损伤
- 4. 未进行STR鉴定直接用于发表数据
注:本产品需在生物安全二级实验室操作,建议定期进行EB病毒潜伏期检测(LMP1表达监控)