一、细胞基本属性
- 细胞名称:NK - 92人恶性非霍奇金淋巴瘤自然杀伤细胞
- 细胞别称:NK - 92细胞;人恶性淋巴瘤NK细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 疾病背景:源自非霍奇金淋巴瘤患者外周血单核细胞(经EB病毒转化)
- 组织来源:外周血单核细胞
- 生长特性:悬浮聚团生长(需依赖IL - 2维持活性)
- 细胞形态:圆形或类圆形,胞体透亮,可见颗粒结构
- 细胞代数:P5 - P10(建议不超过P15代以维持细胞毒性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含血清冻存液)
- 培养基:α - MEM培养基(含12.5%马血清+10%胎牛血清+100 IU/mL重组人IL - 2)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:常规湿度
- 冻存条件:血清型冻存液(含10% DMSO),-150℃液氮长期保存
- 增殖能力:倍增时间约36 - 48小时(需维持IL - 2浓度≥50 IU/mL)
- 应用限制:仅限体外研究,不可用于人体治疗或基因编辑
二、细胞培养操作指南
- 复苏处理:冻存管37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预温培养基;初始接种密度≥2×10^5 cells/mL,48小时内首次换液
- 传代标准:细胞密度达1×10^6 cells/mL或培养液显著酸化(pH<6.8)
- 传代比例:1:2至1:3(维持终浓度≥5×10^5 cells/mL)
- 操作方法:离心收集细胞(200×g,5分钟),旧培养基保留10%用于重悬;轻柔吹打分散细胞团,避免机械损伤
- 注意事项:IL - 2需每48小时补充(浓度不低于50 IU/mL);禁止使用胰酶消化,避免细胞表面受体降解
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础培养基+20%胎牛血清+10% DMSO
- 冻存密度:5×10^6 -1×10^7 cells/mL
- 冻存程序:离心后采用预冷冻存液重悬;程序降温:4℃ 30min → -80℃过夜 → 液氮长期存储
- 质检标准:复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法);功能验证:K562细胞杀伤实验(效靶比10:1时杀伤率≥40%)
四、售后服务承诺
- 质量保障:到货72小时内提供细胞活率证明(附流式检测报告);细胞STR图谱完全匹配ATCC标准数据库(CRL - 2147);支原体检测阴性(PCR法+荧光染色法双验证)
- 重发条款:干冰运输失温导致活率<80%;到货7日内证实微生物污染;细胞系STR位点匹配率<80%
- 免责声明:未按规范补充IL - 2导致的细胞失活;使用非指定培养基培养超过2代;未定期检测支原体造成实验室污染