一、细胞基本属性
- 细胞名称 ：NCI - N87+LUC人胃癌细胞荧光素酶标记
- 细胞别称 ：NCI - 87 - LUC；胃癌荧光素酶报告细胞
- 种属来源 ：人（Homo sapiens）
- 组织来源 ：胃腺癌组织（原代肿瘤来源）
- 生长特性 ：贴壁生长（依赖基质表面接触）
- 细胞形态 ：上皮样多边形，贴壁紧密，聚集成岛状
- 荧光标记 ：稳定表达萤火虫荧光素酶（Luc2基因，CMV启动子驱动）
- 细胞代数 ：P5 - P15（传代稳定性验证，荧光信号持续表达）
- 细胞规格 ：1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基 ：RPMI - 1640培养基（含10% FBS+1μg/mL Puromycin维持筛选压力）
- 培养条件 ：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件 ：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 荧光活性验证 ：≥5000 RLU/μg蛋白（使用荧光素酶底物检测）
- 供应限制 ：仅限肿瘤机制研究及药物筛选，不可用于临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理 ：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基离心洗涤
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱4小时平衡
- 传代标准 ：细胞融合度达80% - 90%（建议3天传代一次）
- 传代比例 ：1:3至1:4（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法 ：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁使细胞脱落
- 注意事项 ：
- 维持1μg/mL Puromycin防止荧光标记丢失
- 传代后48小时内避免药物处理以保证荧光稳定性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方 ：基础培养基+20% FBS+10% DMSO
- 细胞密度 ：冻存浓度：5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤 ：
- 消化后离心收集细胞，重悬于预冷冻存液
- 程序降温：4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮储存
- 复苏验证 ：
- 复苏后24小时存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 荧光活性检测：酶标仪检测RLU值需达冻存前80%
四、售后服务承诺
- 重发标准 ：
- 液氮运输罐温度记录异常导致细胞失活
- 到货7天内PCR检测证实支原体污染
- 荧光素酶活性低于标称值50%（需提供原始检测数据）
- STR分型与数据库记录不符（ATCC认证）
- 不予重发情形 ：
- 未持续添加Puromycin导致标记丢失
- 使用非推荐培养基或血清批次
- 流式分选后未进行单克隆化验证
- 未按规范进行荧光素酶活性标定
注：本产品需配合IVIS成像系统或化学发光检测仪使用，建议定期进行荧光活性监控以保障实验一致性。
