一、细胞基本属性
- 细胞名称:NCI - N87人胃癌细胞
- 细胞别称:NCI - N87;胃腺癌细胞;胃癌细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:胃腺癌组织(原发灶为胃底腺癌,转移至肝脏的恶性组织样本)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿增强贴附)
- 细胞形态:上皮样多角形,呈簇状聚集生长,胞质丰富且核质比高
- 细胞代数:P10 - P15代(经STR鉴定确认遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS + 1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮气相长期保存
- 倍增时间:约48 - 72小时(与培养基批次及接种密度相关)
- 供应限制:仅限科研用途,不得用于药物开发或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后转移至15mL离心管,加5mL培养基离心去冻存液
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置4小时后更换新鲜培养基
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3天观察一次)
- 传代比例:1:2至1:3(初始接种密度推荐1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:
- 终止消化时需加入含血清培养基中和酶活性
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO及胎牛血清)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化后离心收集细胞,重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃平衡30分钟 → 转移至冻存盒置于 - 80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:CCK - 8检测72小时增殖曲线(P10代细胞应维持对数生长期活性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 到货干冰完全融化且细胞存活率低于80%
- 7日内经qPCR证实支原体污染
- STR位点匹配率<85%
- 细胞复苏后出现异常形态(需提供显微照片)
- 不予重发情形:
- 使用胎牛血清替代物导致增殖停滞
- 未按规范进行胶原包直接接种
- 消化时间超过5分钟造成膜蛋白损伤
- 未定期进行支原体预防性处理