一、细胞基本属性
细胞名称:人NCI - H661大细胞肺癌细胞
细胞别称:H661;NCI - H661;肺大细胞癌克隆细胞系
种属来源:人(Homo sapiens)
疾病背景:来源于54岁男性大细胞肺癌患者胸腔积液
组织来源:肺大细胞癌转移灶
生长特性:贴壁生长(可形成松散单层,伴部分悬浮细胞)
细胞形态:多形性上皮样,胞体较大且边界不规则
细胞代数:P4 - P10(STR验证后稳定传代区间)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(无血清冻存体系)
培养基:RPMI - 1640+10% FBS+1%双抗
培养条件:5% CO₂恒温环境,37℃培养,湿度95%
冻存条件:程序降温冻存液(含DMSO及血清替代物),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与培养基血清浓度正相关)
供应限制:仅供肿瘤机制研究,禁止临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管需37℃水浴快速复苏,离心后重悬于预热培养基;培养瓶直接静置培养箱4小时后观察
传代标准:融合度达70% - 80%即需传代(高密度易诱导自发分化)
传代比例:建议1:3至1:4分种(维持5×10⁴ cells/cm²接种密度)
消化方法:采用0.25%胰酶 - EDTA消化,37℃作用3 - 5分钟,离心后完全去除消化酶
注意事项:需定期检测支原体;传代后6小时需补加2mM谷氨酰胺;悬浮细胞需离心回收
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:胎牛血清与DMSO按7:3比例混合
细胞密度:推荐冻存浓度1×10⁷ cells/mL
冻存程序:梯度降温遵循4℃ 1小时→ - 80℃过夜→液氮储存的标准流程
质控标准:复苏存活率≥85%;传代三代内需通过STR位点复核;CD56/NCAM免疫荧光验证神经内分泌特性
四、售后服务承诺
重发保障:运输温度异常(需提供物流温控记录)、到货污染(限48小时内举证)、STR不匹配、复苏存活率<80%
免责条款:未使用指定培养基、冻存超过6个月未转液氮、实验操作污染、未按时支付尾款等情况不予重发
注:本细胞株已通过STR鉴定及EB病毒/支原体检测,建议每3个月进行短期保种,长期研究需建立工作库与主库分级管理体系