一、细胞基本属性
细胞名称:NCI - H520人肺鳞癌细胞
细胞别称:H520;肺鳞状细胞癌;NCI - H520
种属来源:人(Homo sapiens)
组织来源:肺鳞状细胞癌组织
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:多角形或铺路石样排列,胞质丰富,核质比高
细胞代数:P5 - P15(经STR鉴定确保遗传稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(与传代密度及血清浓度相关)
供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶:酒精擦拭外表面,静置培养箱4小时稳定微环境
传代标准:融合度达80% - 90%(高密度易诱发分化)
传代比例:1:3至1:4(建议接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
消化终止需加入含血清培养基充分中和
传代后48小时内避免频繁观察,减少扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖)
细胞密度:1×10^6 - 5×10^6 cells/mL
冻存步骤:
对数生长期细胞经消化离心后重悬于冻存液
程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证:
复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
功能验证:CCK - 8检测增殖曲线(P8代细胞应保持恶性表型)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 干冰运输中温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内经检测存在交叉污染(需提供STR比对报告)
3. 复苏后活率低于80%(需提供台盼蓝染色照片)
不予重发情形:
1. 使用非指定培养基或未包被培养器皿
2. 传代操作不当导致细胞分化或脱落异常
3. 未定期进行支原体检测引发实验污染
4. 液氮保存设备故障导致反复冻融