一、细胞基本属性
细胞名称
人结肠直肠腺癌细胞（Human Colorectal Adenocarcinoma Cells）
细胞别称
NCI - H508；H508；HT - 29亚系
种属来源
人（Homo sapiens）
年龄性别
成年患者（原代取自结肠腺癌组织）
组织来源
结肠癌原发灶组织
生长特性
贴壁生长（依赖细胞间接触及基质支撑）
细胞形态
不规则多角形，核质比高，可形成重叠增殖灶
细胞代数
P5 - P15（建议控制代数维持肿瘤特性稳定性）
细胞规格
1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
培养基
RPMI - 1640（含10% FBS + 1%双抗）
培养条件
气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含DMSO及稳定剂），液氮长期保存
倍增时间
~24 - 36小时（与营养供给及传代密度相关）
供应限制
仅限肿瘤机制研究，禁止临床治疗或生物安全三级以上实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
·冻存管：37℃水浴快速解冻后离心去冻存液，重悬于预热培养基
·培养瓶：表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡4小时
传代标准
融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代）
传代比例
1:3至1:6（推荐初始密度1×10^4 cells/cm²）
消化方法
·使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
·37℃消化2 - 3分钟，机械轻拍促进脱落，FBS终止消化
注意事项
·维持接种密度防止过度接触抑制
·传代后12小时首次换液清除死细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO + 90%培养基）
细胞密度
冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤
·对数生长期收集细胞，梯度降温程序：4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮储存
复苏验证
·复苏后48小时检测贴壁率（≥80%为合格）
·特性验证：CEA分泌检测（P8代细胞应保持>50ng/10^6 cells/24h）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度异常导致细胞失活（需提供温度记录证明）
2. 到货7日内证实交叉污染（需STR鉴定报告）
3. 复苏后活率低于85%（台盼蓝染色复检）
4. 基因突变位点与数据库不符
不予重发情形
1. 未使用指定培养基导致表型改变
2. 擅自进行基因编辑未报备
3. 液氮储存中断超过72小时
4. 未执行标准支原体清除流程
注：所有操作需遵守II级生物安全规范，建议定期进行KRAS基因突变状态验证以维持细胞系特征。
