一、细胞基本属性
细胞名称
NCI - H460 [H460]人大细胞肺癌细胞
细胞别称
H460；大细胞肺癌细胞；肺大细胞癌系
种属来源
人（Homo sapiens）
疾病背景
来源于肺癌患者胸腔积液，经病理确诊为大细胞神经内分泌癌
组织来源
肺组织（转移性胸腔积液）
生长特性
贴壁生长（偶见悬浮细胞需离心后重贴壁）
细胞形态
多角形或类圆形，核质比高，胞质透亮
细胞代数
P5 - P15（建议传代至15代内以维持遗传稳定性）
细胞规格
1×10^6 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
RPMI - 1640（含10% FBS + 1%双抗）
培养条件
气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
倍增时间
~24 - 36小时（依赖传代密度及血清批次）
供应限制
仅限科研用途，不可用于临床或商业用途
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
• 培养瓶：酒精擦拭表面后直接置于培养箱平衡1小时
传代标准
细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代）
传代比例
1:3至1:6（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
消化方法
• 使用0.25% Trypsin - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺）
• 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
• 避免消化过度（易导致细胞成团）
• 传代后48小时内避免频繁观察以降低污染风险
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO + 90% FBS）
细胞密度
冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤
• 消化离心后重悬于冻存液
• 程序降温：4℃ 30min → - 80℃ 过夜 → 液氮长期保存
复苏验证
• 复苏后存活率≥85%（台盼蓝染色法）
• 功能验证：CCK - 8检测增殖曲线（P10代内应保持对数生长特性）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度异常导致细胞团解体（需提供物流温度记录）
2. 到货72小时内证实支原体污染（需提供荧光染色结果）
3. 细胞复苏后贴壁率低于70%
4. STR分型与ATCC数据库不一致
不予重发情形
1. 未按推荐传代比例导致细胞老化
2. 使用含抗生素培养基掩盖潜在污染
3. 未定期进行STR鉴定导致遗传漂移
4. 擅自进行基因编辑后功能异常
