一、细胞基本属性
- 细胞名称：NCI - H295R人肾上腺皮质腺癌细胞
- 细胞别称：H295R细胞；肾上腺皮质癌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：成年女性（原代取自肾上腺皮质腺癌患者）
- 组织来源：肾上腺皮质腺癌组织
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：上皮样细胞，核质比高，成簇生长
- 细胞代数：P5 - P15（建议使用10代以内细胞确保表型稳定）
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
- 培养基：DMEM/F12（含1% ITS+添加剂+2.5% FBS+氢化可的松）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间：约72 - 96小时（依赖培养条件及传代密度）
- 供应限制：仅限肿瘤机制研究与药物筛选，禁止临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴解冻后离心，重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面，静置4小时后更换新鲜培养基
- 传代标准：融合度达80% - 90%（建议每周传代1 - 2次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐密度3×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟，机械吹打辅助分散
- 注意事项：
- 需保留少量旧培养基维持细胞分泌因子平衡
- 传代后48小时内避免频繁观察（易受机械刺激脱落）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：专用无血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化后离心收集细胞，缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮储存
- 复苏验证：
- 复苏存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：类固醇激素分泌检测（P8代细胞应保持基础分泌能力）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 干冰运输期间温度异常（需提供温度记录证明）
- 到货72小时内检测出支原体污染（需提供鉴定报告）
- STR分型与数据库记录不符（需提供完整电泳图谱）
- 不予重发情形：
- 未使用胶原包被培养器皿导致贴壁失败
- 自行更改培养基配方影响细胞增殖
- 超过建议代数仍继续传代引发的功能缺失
- 未定期检测激素分泌特性导致的实验偏差
注：所有操作需在二级生物安全柜中进行，该细胞系具有成瘤性特征，实验废弃物须经高压灭菌处理。
