一、细胞基本属性
细胞名称:NCI - H292人肺癌细胞(淋巴结转移)
细胞别称:H292细胞系、肺粘液表皮样癌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
疾病背景:源自32岁女性肺粘液表皮样癌患者淋巴结转移灶
组织来源:淋巴结转移性肺肿瘤组织
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:上皮样多角形,成簇生长特征
细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数范围)
细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(专用肿瘤细胞冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:5% CO₂恒温环境,37℃培养,湿度>90%
冻存条件:程序降温专用冻存管,液氮气相长期保存
增殖周期:约36 - 48小时(与接种密度正相关)
应用限制:肿瘤机制研究专用,禁止临床治疗或生物移植
二、细胞培养操作指南
收货处理:
• 冻存细胞立即37℃水浴复苏,离心去除冻存液后接种
• 贴壁细胞静置培养24小时后再首次换液
传代标准:融合度达80% - 90%时传代(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
• 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
• 37℃消化3 - 5分钟至细胞间隙增大
操作要点:
• 包被培养皿需使用0.1%明胶预处理
• 传代后需添加2mM谷氨酰胺促进贴壁
• 定期检测EGFR表达维持特性
三、细胞冻存操作规范
冻存配方:无血清冻存液(含7% DMSO+30% FBS)
冻存密度:5×10⁶ cells/mL(高浓度冻存保障复苏率)
冻存流程:
• 对数生长期细胞进行冻存
• 程序降温仪梯度冷冻(-1℃/min至-80℃)
• 24小时内转移至液氮罐
质控标准:
• 复苏存活率≥85%(台盼蓝法检测)
• 冻存前后STR鉴定一致性验证
• 转移特性维持检测(Transwell侵袭实验)
四、售后服务承诺
质量保障:
1. 到货72小时内提供活率证明(附带显微影像)
2. 支原体检测阴性报告随细胞发送
3. 提供STR鉴定原始数据图谱
重发条款:
1. 干冰运输异常导致细胞失活(需提供溶化证据)
2. 到货污染经第三方检测确认
3. 细胞活率低于承诺标准
免责声明:
1. 非标准培养条件导致的状态异常
2. 超过推荐代数使用引发的特性改变
3. 未按要求进行定期支原体检测
4. 液氮保存设备故障导致的冻存失效
(注:本产品配套提供电子版培养手册、STR鉴定报告及质检证书)