一、细胞基本属性
- 细胞名称:NCI - H2452人间皮瘤细胞
- 细胞别称:H2452细胞;胸膜间皮瘤细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:胸膜间皮瘤组织(经病理学确诊)
- 生长特性:贴壁生长(需预包被细胞培养表面)
- 细胞形态:上皮样或多边形,贴壁后呈铺路石样单层排列
- 细胞代数:P3 - P10(建议使用前验证功能性标记物)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含血清冻存液(含DMSO及稳定剂),-150℃液氮长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(依赖传代密度及培养条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精消毒表面,静置于培养箱恢复2小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞脱落
- 注意事项:
- 避免消化过度(影响细胞膜完整性)
- 传代后12小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:含血清冻存液(含10% DMSO+90%胎牛血清)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞,重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞活性(存活率≥85%)
- 功能验证:波形蛋白免疫荧光染色确认间皮特性
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 到货7天内证实支原体污染(需提供第三方检测报告)
- 细胞复苏后活性低于85%(台盼蓝染色法)
- STR分型与数据库记录不符
- 不予重发情形:
- 未按推荐条件保存或延迟复苏超过48小时
- 自行更换培养基导致细胞形态异常
- 未使用预包被培养器皿影响贴壁
- 未定期检测支原体引发交叉污染