一、细胞基本属性
细胞名称:NCI - H23人肺癌细胞
细胞别称:H - 23;人肺腺癌细胞系
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:30岁男性(供体确诊肺腺癌)
组织来源:肺腺癌组织原代分离
生长特性:贴壁生长(无接触抑制特性)
细胞形态:上皮样多角形,核质比高
细胞代数:P5 - P15(建议使用代数范围)
细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管
培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:5% CO₂恒温培养箱,37℃恒温环境
冻存条件:含10% DMSO冻存液,液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(高增殖活性)
供应限制:研究级细胞系,禁止临床或商业用途
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管复苏:37℃水浴60秒内解冻,离心后重悬接种
- 贴壁观察:接种后24 - 48小时完成贴壁伸展
传代标准:融合度达80% - 90%时传代(建议每周传代2次)
传代比例:1:3至1:5(维持高增殖密度)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA消化液
- 37℃消化3 - 5分钟至细胞间隙增大
注意事项:
- 消化终止时需完全中和胰酶活性
- 传代后48小时内避免频繁观察扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:基础培养基+20% FBS+10% DMSO
细胞密度:1×10⁶ cells/mL(最低存活保障浓度)
冻存步骤:
- 细胞悬液与冻存液等体积混合
- 程序降温:4℃→ - 80℃(梯度降温盒)→液氮储存
复苏验证:
- 台盼蓝染色存活率≥85%
- 增殖能力检测:接种后72小时应形成致密单层
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 干冰运输超时导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货48小时内证实微生物污染(需提供检测影像)
3. 细胞复苏存活率低于承诺值(需提供染色证据)
不予重发情形:
1. 使用非标准培养基培养超过3代
2. 未按规范进行传代操作导致污染
3. 液氮储存设备故障造成的细胞损失