一、细胞基本属性
- 细胞名称：NCI - H2228人肺癌细胞
- 细胞别称：H2228；非小细胞肺癌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 组织来源：肺腺癌组织（转移性胸腔积液来源）
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞间接触抑制丧失）
- 细胞形态：上皮样多形性，局部呈现纺锤形或类圆形
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数以保证基因稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO），液氮长期保存
- 倍增时间：~30 - 48小时（受培养密度及血清浓度影响）
- 供应限制：仅限肿瘤机制研究，不可用于临床治疗或食品生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴解冻后转移至15mL离心管，加5mL培养基离心去冻存液
- 培养瓶：表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡4小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐传代周期2 - 3天）
- 传代比例：1:3至1:4（初始接种密度建议3×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA消化液
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项
- 消化终止需加入2倍体积含血清培养基
- 每周进行支原体检测（建议使用PCR法）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础培养基+20% FBS+10% DMSO
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化后细胞悬液离心去上清，预冷冻存液重悬
- 分装至冻存管后程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮转移
- 复苏验证
- 复苏后12小时贴壁率需≥85%
- 特性验证：EML4 - ALK融合基因表达检测（建议每3代复核）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输温度异常导致细胞团碎裂（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内检测到交叉污染（需提供STR比对报告）
- 复苏后贴壁率低于80%（需提供相差显微镜图像）
- 不予重发情形
- 使用非指定培养基导致EML4 - ALK基因表达丢失
- 未定期检测导致支原体污染扩散
- 实验操作不当引发遗传漂变（如长期高密度培养）
- 液氮保存中断超过24小时
