一、细胞基本属性
细胞名称:NCI - H1975人肺腺癌细胞
细胞别称:H1975细胞;肺腺癌细胞;非小细胞肺癌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:肺癌患者(临床样本来源,病史信息保密)
组织来源:肺腺癌组织
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:上皮样多角形,细胞间连接紧密
细胞代数:P3 - P10(推荐使用代数以保证基因稳定性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:含胎牛血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:~36 - 48小时(依赖培养基批次及传代密度)
供应限制:仅限肿瘤学研究,禁止临床治疗或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
·冻存管:37℃水浴轻柔摇晃解冻,离心后重悬于预热培养基
·培养瓶:酒精消毒表面后直接置于CO₂培养箱平衡
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
·使用0.25% Trypsin - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)
·37℃消化3 - 5分钟,机械吹打辅助分散
注意事项:
·避免频繁观察影响培养箱温湿度稳定性
·传代后12小时需补充新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:胎牛血清冻存液(含10% DMSO及葡萄糖)
细胞密度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
·消化离心后重悬于预冷冻存液
·程序降温:4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期存储
复苏验证:
·复苏后48小时检测贴壁率(应≥85%)
·功能验证:CCK - 8增殖曲线需符合标准生长速率
四、售后服务承诺
重发标准:
1.物流温度记录异常导致细胞团块溶解
2.到货7天内经qPCR证实交叉污染
3.STR位点匹配率低于85%
4.复苏72小时内活率<80%(需提供染色视频)
不予重发情形:
1.未使用原代培养基进行传代培养
2.擅自进行基因编辑导致细胞特性改变
3.液氮储存罐维护不当造成冻存管破裂
4.未按ATCC标准进行支原体清除处理