一、细胞基本属性
- 细胞名称：NCI - H1703人肺癌细胞。
- 细胞别称：H1703；非小细胞肺癌细胞。
- 种属来源：人（Homo sapiens）。
- 组织来源：肺腺癌组织（原发灶）。
- 生长特性：贴壁生长（需经胶原蛋白包被培养器皿）。
- 细胞形态：不规则多边形，核质比高，可见伪足延伸。
- 细胞代数：P5 - P15（建议传代不超过20代以保持遗传稳定性）。
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管（含血清型冻存液）。
- 培养基：RPMI - 1640培养基（含10%FBS + 1%双抗）。
- 培养条件：气相：5%CO₂；温度：37℃；湿度：95%。
- 冻存条件：血清型冻存液（含10%DMSO），液氮长期保存。
- 倍增时间：约36 - 48小时（与血清浓度正相关）。
- 供应限制：仅用于肿瘤机制研究，禁止临床治疗或生物制药生产。
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴解冻后离心去冻存液，完全培养基重悬。
- 培养瓶：酒精擦拭表面后直接置于CO₂培养箱。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每2 - 3天传代）。
- 传代比例：1:3至1:5（建议接种密度1×10⁴ cells/cm²）。
- 消化方法：
- 使用0.25%Trypsin - EDTA溶液。
- 37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止。
- 注意事项：
- 避免消化不足导致细胞成片脱落。
- 传代后12小时观察贴壁情况，48小时首次换液。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础培养基+20%FBS + 10%DMSO。
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL。
- 冻存步骤：
- 消化离心后缓慢滴加冻存液混匀。
- 程序降温：4℃30min→ - 80℃24h→液氮长期保存。
- 复苏验证：
- 复苏存活率≥85%（台盼蓝染色法）。
- 功能验证：CCK - 8增殖曲线检测（P8代细胞应保持对数生长期特性）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度记录异常导致细胞团块化（需提供物流温度曲线）。
- 到货72小时内证实真菌污染（需提供革兰氏染色证据）。
- 细胞贴壁率低于70%（需提供接种后24小时显微照片）。
- STR分型与ATCC数据库差异超过3个位点。
- 不予重发情形：
- 未使用原代培养液进行复苏操作。
- 私自进行基因编辑导致细胞特性改变。
- 未按规范进行定期支原体检测。
- 使用非无菌操作引发交叉污染。
