一、细胞基本属性
- 细胞名称：NCI - H1688人经典小细胞肺癌细胞
- 细胞别称：H1688；小细胞肺癌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 疾病背景：源自小细胞肺癌患者胸腔积液（经病理学确诊）
- 组织来源：转移性小细胞肺癌组织
- 生长特性：悬浮聚集成团生长（部分贴壁亚群需轻微离心辅助）
- 细胞形态：圆形或卵圆形，单细胞或松散聚集，折光性强
- 细胞代数：P3 - P15（建议使用P5 - P10代以保证实验一致性）
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含10% DMSO冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640基础培养基（含10% FBS+2mM L - 谷氨酰胺+1%青霉素/链霉素）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：含血清冻存液（10% DMSO+90% FBS），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 60小时（依赖培养基成分及细胞密度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基。
- 培养瓶：酒精擦拭表面，直接置于培养箱静置4 - 6小时。
- 传代标准：悬浮细胞密度达1×10⁶ cells/mL或贴壁亚群融合度达80%。
- 传代比例：
- 悬浮细胞：按1:2至1:3稀释。
- 贴壁亚群：0.25%胰酶消化2 - 3分钟。
- 传代方法：
- 悬浮细胞：直接离心收集后重悬分瓶。
- 贴壁亚群：使用0.25% Trypsin - EDTA消化终止后离心。
- 注意事项：
- 避免频繁离心损伤悬浮细胞膜完整性。
- 贴壁亚群需轻柔吹打防止细胞碎片增多。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：90%完全培养基+10% DMSO。
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL。
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后重悬于冻存液。
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 转入液氮。
- 复苏验证：
- 存活率≥85%（台盼蓝染色法）。
- 功能验证：NSE分泌检测（P5代细胞应维持典型小细胞肺癌标志物表达）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供温度记录证明）。
- 5日内证实支原体/真菌污染（需提供第三方检测报告）。
- 悬浮细胞存活率低于80%或贴壁亚群贴壁率低于50%。
- 不予重发情形：
- 未按推荐方法进行贴壁亚群传代导致细胞丢失。
- 使用无血清培养基或未补充L - 谷氨酰胺。
- 液氮保存期间温度高于-130℃。
- 未定期进行STR鉴定导致细胞交叉污染。
