一、细胞基本属性
细胞名称
NCI - H1650[H1650](MKN - 1)人肺支气管癌细胞
细胞别称
H1650;MKN - 1;人肺腺癌细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
组织来源
肺支气管癌组织
生长特性
贴壁生长(部分亚系可能呈现半悬浮特性)
细胞形态
上皮样多角形,核质比高,成簇分布
细胞代数
P3 - P10(建议使用代数内进行实验以保持表型稳定)
细胞规格
1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
RPMI - 1640培养基(含10% FBS + 1%双抗)
培养条件
气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间
约30 - 48小时(受培养密度及传代操作影响)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
· 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
· 培养瓶:表面消毒后直接置于CO₂培养箱静置4小时
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 4天传代)
传代比例
1:3至1:6(推荐接种密度2×10⁴ cells/cm²)
消化方法
· 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
· 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
· 避免过度消化导致细胞聚集
· 传代后需间隔48小时再进行实验操作
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及营养保护剂)
细胞密度
冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
· 消化收集细胞后离心去上清
· 梯度降温程序:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮储存
复苏验证
· 复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法)
· 传代稳定性检测:P5代细胞需保持典型上皮形态
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供污染检测证据)
3. 复苏存活率低于85%
4. STR分型与数据库不匹配
不予重发情形
1. 收到细胞后超72小时未进行复苏操作
2. 使用非推荐培养基导致细胞形态异常
3. 擅自修改培养条件引发的功能缺失
4. 未定期进行支原体检测导致的交叉污染