一、细胞基本属性
- 细胞名称
- NCI - H157人非小细胞肺腺癌细胞
- 细胞别称
- H157;肺腺癌细胞;非小细胞肺癌细胞
- 种属来源
- 人(Homo sapiens)
- 疾病背景
- 源自人肺腺癌组织,具有典型非小细胞肺癌病理特征
- 组织来源
- 肺腺癌原发灶组织
- 生长特性
- 贴壁生长(需经胶原蛋白或纤连蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态
- 上皮样多角形,融合后呈铺路石状排列
- 细胞代数
- P5 - P15(推荐使用代数内维持增殖稳定性)
- 细胞规格
- 1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基
- RPMI - 1640(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件
- 气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件
- 无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间
- 约48 - 60小时(依培养密度及传代操作差异)
- 供应限制
- 仅限于基础研究,禁止临床应用或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管需37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶经酒精消毒后直接置于CO₂培养箱静置4小时。
- 传代标准
- 细胞融合度达80% - 90%(建议每3天观察一次)
- 传代比例
- 1:3至1:4(推荐初始接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后立即加入完全培养基终止。
- 注意事项
- 避免消化过度导致细胞膜损伤;传代后48小时内需更换新鲜培养基以稳定细胞状态。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方
- 无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度
- 冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管,按程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存。
- 复苏验证
- 复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法);功能验证需通过CCK - 8检测P5代细胞增殖曲线符合标准。
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 2. 到货72小时内经qPCR证实支原体污染
- 3. STR基因分型与数据库不匹配
- 4. 复苏后存活率低于80%(需提供染色检测视频)
- 不予重发情形
- 1. 客户未按指南进行预包被处理导致贴壁失败
- 2. 使用非指定培养基或血清浓度超标
- 3. 反复冻融或长期超代次传代引发遗传漂变
- 4. 未执行定期支原体检测造成污染扩散