一、细胞基本属性
- 细胞名称:NCI - H1437人肺癌细胞
- 细胞别称:H1437;肺腺癌细胞系;非小细胞肺癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:成年男性(原代供体确诊肺腺癌伴胸腔转移)
- 组织来源:肺腺癌转移灶胸腔积液
- 生长特性:贴壁生长(部分亚群可形成悬浮细胞团)
- 细胞形态:上皮样多角形为主,核质比高,可见伪足延伸
- 细胞代数:P3 - P10(建议控制传代次数维持基因组稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:~36 - 48小时(受培养基血清批次影响)
- 供应限制:仅限肿瘤机制研究,禁止临床治疗或转基因实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管复苏:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬接种
- 培养瓶运输:静置培养箱4小时后更换新鲜培养基
- 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:6(根据实验需求调整接种密度)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含酚红指示剂)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促进细胞脱落
- 注意事项:
- 避免消化液残留影响细胞贴壁(建议离心后重悬)
- 传代后48小时内避免药物处理或转染实验
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:含血清冻存液(90%完全培养基+10% DMSO)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:
- 对数生长期细胞消化后离心收集
- 程序降温盒梯度冻存:4℃ 30min → - 80℃过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测贴壁率(应≥85%)
- 功能验证:CCK - 8增殖曲线(P5代细胞需维持恶性表型)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 5日内证实交叉污染(需STR鉴定报告)
- 复苏后贴壁率低于80%(需提供显微照片)
- 不予重发情形:
- 使用无血清培养基导致细胞凋亡
- 未定期支原体检测造成实验污染扩散
- 擅自进行基因编辑导致细胞特性改变
- 超代次传代(P10以上)引发的功能异常