一、细胞基本属性
- 细胞名称：NCI - H1299人非小细胞肺癌细胞
- 细胞别称：H1299；非小细胞肺癌细胞；大细胞肺癌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：成年患者（原发肿瘤组织来源，临床信息受隐私保护）
- 组织来源：肺组织（淋巴结转移灶来源，经病理学确认）
- 生长特性：贴壁生长（可形成疏松单层，接触抑制不明显）
- 细胞形态：上皮样，多角形至梭形，核质比高
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数内保证增殖稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含血清型冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640培养基（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：含血清冻存液（含DMSO及蛋白保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约30 - 48小时（受培养密度及血清批次影响）
- 供应限制：仅用于体外研究，不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，转移至含5mL预热培养基的离心管，900rpm离心3分钟，弃上清后重悬接种。培养瓶：酒精消毒后直接置于培养箱平衡4小时，首次换液前观察贴壁状态。
- 传代标准：融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）。
- 传代比例：1:3至1:6（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）。
- 消化方法：使用0.25% Trypsin - EDTA（含酚红指示剂），37℃消化2 - 3分钟，观察到细胞间隙增大后立即加入含血清培养基终止。
- 注意事项：消化后需轻柔吹打避免细胞成团，传代后6小时内不宜移动培养瓶，48小时内避免换液。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：含血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS）。
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL。
- 冻存步骤：离心收集细胞后缓慢滴加冻存液混匀，分装至冻存管。程序降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期储存。
- 复苏验证：复苏存活率≥85%（台盼蓝染色法），传代后需通过CCK - 8检测验证增殖曲线符合标准。
四、售后服务承诺
- 重发标准：1. 运输温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度监控截图）。2. 到货72小时内经qPCR证实支原体污染。3. STR分型结果与ATCC数据库不匹配。4. 复苏后贴壁率低于80%（需提供接种后24小时明场照片）。
- 不予重发情形：1. 使用非指定培养基（如DMEM/LB等）导致生长异常。2. 未按规范进行胰酶消化引发细胞团块化。3. 冻存管未经梯度降温直接投入液氮。4. 收到细胞后超72小时未进行复苏操作。
