一、细胞基本属性
细胞名称:人急性早幼粒细胞白血病细胞(Human Acute Promyelocytic Leukemia Cells)
细胞别称:NB4细胞系;APL细胞;急性髓系白血病细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:女性患者(16岁,伴急性早幼粒细胞白血病病史)
组织来源:骨髓或外周血(携带PML - RARα融合基因)
生长特性:悬浮生长(偶见轻微贴壁现象)
细胞形态:圆形或类圆形,聚集成团,胞质丰富
细胞代数:P3 - P10(经STR鉴定确保遗传稳定性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS+1%青霉素 - 链霉素)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃液氮长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(依赖细胞密度与培养条件)
供应限制:仅限科学研究,禁止临床或商业用途
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴解冻后立即离心(200×g,5分钟),去除冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶:直接置于培养箱静置4小时,待细胞悬浮稳定后更换新鲜培养基
传代标准:细胞密度达1×10⁶ cells/mL(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:2至1:4(维持密度在2×10⁵ - 8×10⁵ cells/mL)
操作方法:
离心收集细胞(200×g,5分钟),旧培养基保留部分用于重悬
无需酶消化,直接按比例分装至新培养瓶
注意事项:
避免剧烈吹打(防止细胞机械损伤)
定期检测PML - RARα融合基因表达(建议每5代验证一次)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
离心收集细胞后缓慢滴加冻存液
程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证:
复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法)
功能验证:全反式维甲酸(ATRA)诱导分化能力检测
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. 细胞存活率低于85%或STR鉴定不符
4. PML - RARα融合基因表达缺失
不予重发情形:
1. 使用非指定培养基或添加未经验证的诱导剂
2. 未按悬浮细胞特性进行静置培养导致聚集
3. 未定期进行支原体检测引发交叉污染
4. 液氮保存中断超过24小时