一、细胞基本属性
- 细胞名称:人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞(MUM2B)
- 细胞别称:脉络膜黑色素瘤细胞;MUM2B细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 疾病背景:源于脉络膜黑色素瘤患者原发灶,具有高侵袭性和转移潜能
- 组织来源:脉络膜黑色素瘤组织(病理分级为T3期以上)
- 生长特性:贴壁生长(部分亚群可呈现悬浮聚集现象)
- 细胞形态:多形性特征,以梭形为主,胞质丰富,核仁明显
- 细胞代数:P5 - P15(建议使用前10代以保证表型稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI 1640(含10% FBS+1%双抗+1%丙酮酸钠)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约48 - 60小时(受培养基批次及接种密度影响)
- 供应限制:仅限肿瘤机制研究或药物筛选用途,禁止临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置30分钟后移入培养箱
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(贴壁细胞呈现重叠生长趋势时需及时传代)
- 传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落,立即加入含血清培养基终止
- 注意事项:
- 避免消化不足导致细胞成片脱落
- 传代后48小时内观察细胞贴壁情况,必要时补充生长因子
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化后离心收集细胞,缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:Transwell侵袭实验(P8代细胞应保持基础侵袭能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 1.干冰运输超72小时或温度记录异常(需提供物流温度曲线)
- 2.7天内证实支原体/真菌污染(需提供第三方检测报告)
- 3.细胞复苏存活率低于80%
- 4.STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 1.客户未按推荐培养基培养导致细胞分化
- 2.实验操作污染(如超净台未定期灭菌)
- 3.冻存管经历两次以上复冻循环
- 4.未进行STR鉴定直接用于论文发表