一、细胞基本属性
细胞名称：人乳腺癌细胞（Human Breast Adenocarcinoma Cells）
细胞别称：MDA - MB - 468；乳腺癌细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
组织来源：源自51岁女性乳腺癌患者胸腔积液转移灶
生长特性：贴壁生长（需纤维连接蛋白包被培养器皿）
细胞形态：上皮样多角形，高核质比，易形成松散单层
细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数以保证表型稳定性）
细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：Leibovitz's L - 15培养基（含10% FBS，无需CO₂环境）
培养条件：气相：100%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间：~30 - 48小时（与培养基血清浓度正相关）
供应限制：仅限于基础研究与药物开发，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
• 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
• 培养瓶：75%酒精表面消毒后直接置于37℃恒温培养箱
传代标准：细胞融合度达70% - 80%（建议每2 - 3天传代一次）
传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度3×10^4 cells/cm²）
消化方法：
• 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
• 37℃消化3 - 5分钟，显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止
注意事项：
• 禁止使用CO₂培养箱（L - 15培养基含高浓度缓冲体系）
• 传代后需间隔48小时更换培养基以稳定细胞代谢
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及血清替代物）
细胞密度：冻存浓度：5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
冻存步骤：
• 消化离心后细胞沉淀轻柔重悬于冻存液
• 程序降温：4℃30min → - 80℃24h → 液氮长期保存
复苏验证：
• 复苏后48小时检测细胞贴壁率（标准≥85%）
• 功能验证：EGFR蛋白表达免疫荧光检测（需保持高表达特性）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程温度异常导致细胞团块溶解（需提供温度记录证据）
2. 5日内经qPCR证实支原体污染（需提交完整检测原始数据）
3. 复苏后贴壁率低于80%（需提供接种后24小时显微照片）
4. STR分型与ATCC数据库不匹配（偏差≥2个位点）
不予重发情形：
1. 解冻后未在12小时内进行首次换液操作
2. 擅自改用DMEM/RPMI - 1640等非适配培养基
3. 未按规范进行EGFR表达监测导致实验结论偏差
4. 液氮保存中断超过30分钟仍强行冻存
