一、细胞基本属性
细胞名称
MDA - MB - 415人乳腺癌细胞（Human Breast Cancer Cell Line MDA - MB - 415）
细胞别称
MB - 415；乳腺导管癌细胞；转移性乳腺癌细胞
种属来源
人（Homo sapiens）
年龄性别
成年女性（原代供体为43岁乳腺癌患者）
组织来源
乳腺腺癌组织（转移性胸腔积液分离）
生长特性
贴壁生长（需胶原包被培养器皿）
细胞形态
不规则多角形或纺锤形，核质比高，常见重叠生长
细胞代数
P5 - P15（推荐使用代数以确保表型稳定性）
细胞规格
1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含血清型冻存液）
培养基
Leibovitz's L - 15培养基（含10% FBS + 2mM L -谷氨酰胺）
培养条件
气相：100%空气（无需CO₂）；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
血清型冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间
~72 - 96小时（受培养密度与传代操作影响）
供应限制
仅限肿瘤机制研究及药物筛选，禁止临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理
・冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基离心洗涤
・培养瓶：酒精消毒后静置30分钟再移入培养箱
传代标准
细胞融合度达70% - 80%（高密度易引发异常分化）
传代比例
1:3至1:4（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
消化方法
・使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.1%胶原酶）
・37℃消化3 - 5分钟，机械轻拍辅助脱落
注意事项
・胶原包被培养皿可提高贴壁效率
・传代后48小时内避免换液以维持细胞分泌因子
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
血清型冻存液（含20% FBS + 10% DMSO）
细胞密度
冻存浓度：5×10⁶-1×10⁷ cells/mL
冻存步骤
・消化后离心去除胰酶，重悬于预冷冻存液
・程序降温：4℃ 30min → -80℃ 24h → 液氮长期存储
复苏验证
・复苏后48小时检测活力（台盼蓝染色存活率≥85%）
・功能验证：软琼脂克隆形成实验（P8代应保持致瘤特性）
四、售后服务承诺
重发标准
1.运输温度记录异常导致细胞失活（需提供温度监测曲线）
2.7天内证实交叉污染（需提供STR鉴定报告）
3.复苏后贴壁率低于50%（需提供相差显微镜图像）
4.细胞形态学特征与描述不符
不予重发情形
1.未使用胶原包被培养器皿导致贴壁失败
2.擅自改用含CO₂培养系统干扰细胞代谢
3.未按规范进行传代引发基因组不稳定性
4.超过建议代数（P15）后出现的表型漂移
