一、细胞基本属性
- 细胞名称:MDA - MB - 361人乳腺癌细胞
- 细胞别称:MDA - MB - 361;乳腺腺癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 疾病背景:源自44岁女性乳腺癌患者胸腔积液(雌激素受体阳性)
- 组织来源:乳腺腺癌组织转移灶
- 生长特性:贴壁生长(部分细胞可呈半悬浮聚集)
- 细胞形态:上皮样多角形,核质比高,易形成重叠生长
- 细胞代数:P4 - P10(建议传代次数不超过15代)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
- 培养基:Leibovitz's L - 15培养基(含10%FBS+2mM L - 谷氨酰胺)
- 培养条件:气相:100%空气(无需CO₂);温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含10% DMSO的胎牛血清冻存液,-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~50 - 60小时(与培养基批次相关)
- 供应限制:仅限肿瘤学研究,禁止临床治疗或转基因实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭表面后静置4小时再换液
- 传代标准:细胞融合度达70% - 80%(高密度易导致脱落)
- 传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁辅助分离
- 注意事项:
- 避免过度延长消化时间(易损伤膜表面受体)
- 培养基需预热至37℃以维持细胞黏附能力
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:90%FBS+10% DMSO(建议现配现用)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化后离心去上清,缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温:4℃ 30min→ - 80℃ 24h→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测贴壁率(应≥85%)
- 功能验证:ERα免疫荧光染色(需保持受体表达)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 液氮运输罐真空失效导致细胞失活(需提供温度记录)
- 7天内经qPCR证实支原体污染
- 复苏后贴壁率低于80%(需提交显微照片)
- STR分型与ATCC数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 使用CO₂培养箱导致培养基pH异常
- 未定期进行支原体预防性处理
- 擅自进行基因编辑导致细胞特性改变
- 超低温冰箱断电未及时转移细胞