一、细胞基本属性
细胞名称：MDA - MB - 231+LUC人乳腺癌细胞（荧光素酶标记）
细胞别称：MDA - MB - 231 - LUC；231 - LUC；人乳腺癌荧光素酶报告细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
疾病背景：三阴性乳腺癌（源自成年女性患者胸腔积液转移灶）
组织来源：乳腺腺癌组织
生长特性：贴壁生长（低血清依赖性）
细胞形态：不规则多边形，部分呈纺锤形，贴壁紧密
荧光素酶特性：稳定表达Firefly Luciferase，需用D - 荧光素底物检测活性
细胞代数：P5 - P15（功能稳定性已验证）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗+2μg/mL嘌呤霉素维持筛选）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间：~24 - 48小时（依赖传代密度与培养基条件）
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶：酒精擦拭表面，静置培养箱4小时待细胞贴壁后换液
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
传代比例：1:3至1:6（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
消化方法：
使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
37℃消化1 - 3分钟，镜下观察细胞间隙扩大后终止
注意事项：
维持2μg/mL嘌呤霉素筛选压力（防止荧光素酶表达丢失）
传代后48小时内避免强光照射（减少荧光素酶光漂白）
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤：
消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
程序降温：4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃ 24h → 液氮长期保存
复苏验证：
复苏后48小时检测荧光素酶活性（IVIS成像系统验证发光强度）
功能验证：细胞迁移实验（Transwell）及成瘤性检测（裸鼠模型）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程干冰耗尽导致细胞失活（需提供物流温度记录）
2. 7天内证实荧光素酶活性缺失（需提供IVIS检测原始数据）
3. 支原体污染经第三方检测确认（需附检测报告）
4. STR分型与ATCC数据库不一致
不予重发情形：
1. 未持续使用嘌呤霉素筛选导致荧光素酶表达丢失
2. 使用非推荐培养基或血清批次
3. 液氮保存中断超过24小时
4. 实验操作不当导致生物发光信号衰减
（注：所有实验需遵守生物安全规范，荧光素酶标记细胞不可直接排放至公共下水系统）
