一、细胞基本属性
- 细胞名称:MDA - MB - 157人乳腺癌细胞
- 细胞别称:MDA - MB - 157;乳腺癌细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:75岁女性(原代取自乳腺导管癌组织)
- 组织来源:乳腺导管癌原发肿瘤组织
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:不规则多边形,部分呈纺锤形,细胞边界清晰
- 细胞代数:P5 - P15(建议使用中低代数维持表型稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:Leibovitz's L - 15培养基(含10%FBS+1%胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒添加剂)
- 培养条件:气相:100%空气(无需CO₂);温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含7.5%DMSO及能量代谢保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约36 - 48小时(与细胞密度及传代操作相关)
- 供应限制:仅限肿瘤学研究,禁止用于药物生产或转基因生物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻后离心去冻存液,加入预热培养基重悬
- 培养瓶:酒精擦拭外壁后立即转入37℃培养箱平衡4小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 85%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度8×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,观察到细胞间隙扩大后轻拍瓶壁促进脱落
- 注意事项:
- 禁止使用含钙镁离子的缓冲液冲洗(防止酶活性抑制)
- 传代后需静置24小时再更换培养基(减少机械应力损伤)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含7.5%DMSO+海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 8×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化后细胞经预冷PBS清洗两次
- 逐滴加入冻存液混匀后分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30min→ - 80℃ 24h→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率(标准≥85%)
- 功能验证:Transwell侵袭实验(P10代细胞应保持基础侵袭能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 物流温度记录显示超温(需提供运输温度曲线图)
- 5个工作日内证实真菌污染(需提供镜检视频证据)
- 细胞贴壁率低于80%(需提供相差显微镜图像)
- STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 使用含CO₂培养箱导致细胞酸化损伤
- 未按规范进行胶原包直接接种
- 擅自使用其他消化酶导致细胞膜损伤
- 超过建议代数仍要求性能保证