一、细胞基本属性
- 细胞名称:MCF - 7/Adr人乳腺癌阿霉素耐药细胞
- 细胞别称:MCF - 7/Adr细胞;阿霉素耐药乳腺癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:人乳腺癌细胞系MCF - 7经阿霉素梯度诱导建立的耐药亚系
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞间紧密连接及耐药表型维持)
- 细胞形态:上皮样多角形,贴壁紧密,高密度时呈铺路石样排列
- 细胞代数:P5 - P15(建议使用前10代以保证耐药性稳定)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%青霉素/链霉素+1μg/mL阿霉素维持耐药性)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(与阿霉素浓度及培养条件相关)
- 供应限制:仅限科学研究,不可用于临床、药物开发或生物医学工程
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶:酒精表面消毒后静置培养箱4小时再观察贴壁
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(耐药株生长速度较母系减缓)
- 传代比例:1:3至1:6(推荐初始接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25% Trypsin - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:传代后需持续添加阿霉素(0.5 - 1μg/mL)维持耐药性;避免频繁更换培养基导致耐药基因表达波动
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:含10% DMSO的完全培养基(含阿霉素)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:消化离心后重悬于冻存液;程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
- 复苏验证:复苏后48小时检测细胞存活率≥85%;耐药性验证:1μg/mL阿霉素处理72小时存活率>70%
四、售后服务承诺
- 重发标准:1.干冰运输期间温度异常导致细胞死亡(需提供温度记录证明);2.到货7日内经检测证实支原体/真菌污染(需提供检测报告);3.STR分型与数据库记录不符(需提供双向测序结果)
- 不予重发情形:1.未按规范维持阿霉素浓度导致耐药性丢失;2.使用非指定培养基或血清培养超过2代;3.未定期进行耐药性验证即开展关键实验;4.液氮储存不当导致细胞失活