一、细胞基本属性
- 细胞名称：MCF - 7人乳腺癌细胞
- 细胞别称：MCF - 7细胞；乳腺癌细胞系
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：69岁女性（原代取自转移性胸腔积液）
- 组织来源：乳腺腺癌组织
- 生长特性：贴壁生长（需依赖细胞间接触）
- 细胞形态：上皮样，单层贴壁呈铺路石状
- 细胞代数：P4 - P15（推荐使用P4 - P10代以保证表型稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管（含含血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12（含10% FBS+1%非必需氨基酸+10 μg/mL胰岛素）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：含血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：~36 - 48小时（依赖培养基成分及传代密度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精擦拭外壁，静置培养箱4小时恢复代谢
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含酚红指示剂）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：
- 消化后需加入等体积含血清培养基终止反应
- 传代后48小时内避免频繁观察，减少机械扰动
- 定期检测雌激素受体（ER）表达以维持特性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：含血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化收集细胞，离心后重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率（应≥85%）
- 功能验证：雌激素刺激实验（P8代细胞应保持增殖响应）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度记录异常导致细胞死亡（需提供物流温度监控证明）
- 7日内证实支原体/真菌污染（需提供第三方检测报告）
- 复苏后贴壁率低于80%（需提供显微照片及操作记录）
- STR图谱与ATCC标准数据库偏离＞3个位点
- 不予重发情形：
- 未按规范使用无酚红培养基进行雌激素相关实验
- 长期传代至P15代后出现基因漂移
- 擅自改用三维培养体系导致特性改变
- 未进行定期支原体检测引发交叉污染
（注：所有操作需符合生物安全二级实验室规范，建议使用专用培养箱避免交叉污染。）
