一、细胞基本属性
细胞名称：人乳腺上皮细胞（Human Mammary Epithelial Cells）
细胞别称：MCF - 10A；乳腺上皮细胞系；正常乳腺上皮细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：健康成年女性（供体筛选无乳腺疾病史）
组织来源：乳腺组织（经乳腺增生手术获取）
生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白基质）
细胞形态：典型上皮样单层，接触抑制后呈铺路石状排列
细胞代数：P3 - P8（推荐使用P4 - P6代以保证功能稳定性）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用无血清冻存液）
培养基：DMEM/F12培养基（添加5%马血清+20ng/mL EGF+0.5μg/mL氢化可的松）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间：约36 - 48小时（受培养基批次及接种密度影响）
供应限制：仅限体外科研使用，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
冻存管：37℃水浴快速解冻后离心去冻存液，用预热培养基重悬接种
培养瓶：酒精消毒表面后直接置于CO₂培养箱平衡2小时
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每5 - 7天传代一次）
传代比例：1:2至1:3（推荐密度3×10³ cells/cm²）
消化方法：
使用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液（含0.1%胶原酶）
37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后轻柔吹打终止
注意事项：
需预先包被培养皿（推荐0.3mg/mL胶原蛋白溶液）
消化后需离心去除残留酶，首次换液时间不早于接种后12小时
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清细胞冻存液（含10% DMSO+90%培养基）
细胞密度：推荐冻存浓度1 - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
离心收集细胞后缓慢滴加冻存液混匀
程序降温：4℃预冷30分钟→-80℃过夜→液氮长期储存
复苏验证：
复苏后48小时内检测细胞贴壁率（应≥85%）
功能验证：E - cadherin免疫荧光染色（P5代细胞需维持完整细胞连接）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供冷链记录）
2. 到货7天内经PCR证实支原体污染（需提供完整检测视频）
3. 复苏后活率低于85%（台盼蓝染色法复检确认）
4. STR分型与ATCC标准数据库偏差＞5%
不予重发情形：
1. 使用非推荐胶原蛋白包被导致细胞脱落
2. 自行添加高浓度雌激素或致癌诱导剂
3. 未按要求进行定期传代导致细胞老化
4. 未使用配套生长因子添加剂引发表型改变
