一、细胞基本属性
- 细胞名称：LX-2+GFP人肝星形细胞（LX-2+GFP Human Hepatic Stellate Cells）
- 细胞别称：肝星状细胞 - GFP；HSC - GFP；LX-2 - GFP
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体无肝脏疾病史）
- 组织来源：肝脏组织
- 生长特性：贴壁生长（需胶原包被培养器皿）
- 细胞形态：活化后呈纺锤形或星形，未活化状态扁平状
- 细胞代数：P3 - P8（保证GFP标记稳定性及功能特性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%青霉素/链霉素+2mM L - 谷氨酰胺）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- GFP特性：稳定转染绿色荧光蛋白（GFP），便于活细胞示踪及成像分析
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基接种；培养瓶：酒精擦拭表面后静置培养箱平衡2小时，避免晃动
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA，37℃消化1 - 2分钟，终止后轻柔吹打
- 注意事项：避免长时间消化（防止GFP蛋白降解）；传代后6小时补充新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：离心收集细胞后重悬于冻存液，梯度降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证：复苏后48小时内检测GFP荧光强度（≥90%表达率）；功能验证：α - SMA免疫荧光染色（P5代细胞应维持活化特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中干冰耗尽或温度异常（需提供物流记录）
- 到货3天内证实细菌/真菌污染（需提供污染检测证据）
- GFP荧光表达率低于80%（流式细胞术检测）
- 细胞STR谱系与数据库不匹配
- 不予重发情形：
- 未使用胶原包被培养器皿导致贴壁失败
- 自行更换培养基成分影响GFP稳定性
- 解冻后未及时传代导致细胞老化
- 未按规范进行荧光强度校准即开展成像实验
