一、细胞基本属性
- 细胞名称：LX-2人肝星形细胞（LX-2 Human Hepatic Stellate Cells）
- 细胞别称：肝星状细胞；肝星形细胞；HSC
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无肝脏疾病史）
- 组织来源：肝脏组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质成分）
- 细胞形态：典型长梭形或星形，活化后呈肌成纤维细胞样
- 细胞代数：P5 - P10（保证功能稳定性与遗传一致性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12培养基（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 72小时（依赖培养密度与血清浓度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精擦拭外壁后静置培养箱1小时平衡
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每3 - 5天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺）
- 37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项
- 避免频繁传代（防止自发活化）
- 传代后48小时内避免换液以维持细胞贴附
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后重悬于预冷冻存液
- 梯度降温：4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（≥90%）
- 功能验证：α - SMA免疫荧光检测（P5代细胞应维持静息态特征）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 5天内证实支原体/真菌污染（需提供荧光染色报告）
- 细胞复苏存活率低于85%（需提供染色原始图像）
- STR鉴定结果与数据库不匹配
- 不予重发情形
- 未按规范进行预贴壁处理导致细胞丢失
- 使用高浓度血清诱导细胞异常活化
- 未定期检测自噬标志物导致实验偏差
- 超过推荐代数（P10）后出现功能衰退
