一、细胞基本属性
- 细胞名称：LS513人结直肠癌细胞
- 细胞别称：结直肠腺癌细胞；结直肠癌上皮细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 疾病背景：源自结直肠癌患者原发肿瘤组织，具有腺癌典型特征
- 组织来源：结直肠肿瘤组织（病理分级为中分化腺癌）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原包被培养器皿以增强贴附性）
- 细胞形态：上皮样多角形，核质比高，聚集成片状生长
- 细胞代数：P3 - P10（推荐使用代数内维持基因组稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640培养基（含10% FBS+1%双抗+1mM丙酮酸钠）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间：~36 - 48小时（与血清浓度及接种密度相关）
- 供应限制：仅供肿瘤机制研究，禁止用于药物筛选以外的商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴解冻后离心去冻存液，重悬于预热培养基。
- 培养瓶：酒精消毒后静置培养箱4小时再换液。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（接触抑制后需及时传代）
- 传代比例：1:3至1:5（推荐密度2×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺）。
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落。
- 注意事项：
- 消化后需完全中和胰酶（残留酶抑制细胞贴壁）。
- 传代后48小时内避免频繁观察（减少扰动）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+90%胎牛血清）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管。
- 程序降温：4℃ 30min → - 80℃过夜 → 液氮储存。
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测贴壁率（应≥85%）。
- 功能验证：CCK - 8增殖曲线检测（P5代细胞倍增时间需符合标准）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度异常导致细胞团块溶解（需提供物流温度记录）。
- 5天内证实真菌/支原体污染（需提供电镜或PCR结果）。
- 细胞贴壁率低于80%（需提供复苏后显微照片）。
- STR分型与ATCC数据库不一致。
- 不予重发情形：
- 未使用胶原包被培养皿导致细胞脱落。
- 自行修改培养基配方引发代谢异常。
- 长时间高密度培养导致衰老表型。
- 未定期进行STR鉴定导致交叉污染。
