一、细胞基本属性
细胞名称:LS180人结直肠癌细胞
细胞别称:LS - 180;结肠腺癌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
疾病背景:源自58岁女性结直肠腺癌患者的原位癌组织
组织来源:结直肠腺癌组织
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:上皮样多角形,成簇贴壁,核质比高
细胞代数:P15 - P25(经STR鉴定确认遗传稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含血清型冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:血清型冻存液(含10% DMSO),液氮气相长期保存
倍增时间:~36 - 48小时(与传代密度正相关)
应用范围:结直肠癌机制研究、药物敏感性测试、上皮屏障模型构建
二、细胞培养操作指南
收货处理:
1. 冻存管复苏采用37℃水浴解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
2. 培养瓶收货后酒精擦拭表面,静置培养箱4小时再换液
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每周传代2次)
传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
1. 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含钙离子螯合剂)
2. 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察到细胞间隙增大时终止
注意事项:
1. 传代需保留少量旧培养基维持细胞黏附因子
2. 消化终止后需轻柔吹打避免细胞团形成
3. 建议定期检测CEA分泌水平验证功能特性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:基础培养基+20% FBS+10% DMSO
细胞密度:冻存浓度5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤:
1. 对数生长期细胞经离心后重悬于预冷冻存液
2. 程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期存储
质量验证:
1. 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
2. 功能验证:黏液分泌能力检测(阿尔新蓝染色法)
3. 传代稳定性:STR位点每5代检测一次
四、售后服务承诺
重发保障:
1. 干冰运输温度异常导致细胞失活(需提供温度记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. STR分型与数据库记录不符(CODIS位点验证)
4. 原代冻存细胞复苏后贴壁率<70%
免责条款:
1. 未按说明书进行胶原包被导致生长异常
2. 擅自改用无血清培养体系影响细胞特性
3. 未执行定期传代导致细胞过度老化
4. 实验操作污染后继续培养造成的交叉污染
注:本产品仅供科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗用途。建议每3个月进行支原体检测,培养过程中出现异常黏液分泌属细胞正常特性。