一、细胞基本属性
- 细胞名称:人结肠腺癌细胞(LS1034 Cell Line)
- 细胞别称:LS - 1034;结肠腺癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:结肠腺癌组织
- 生长特性:贴壁生长(需细胞外基质支持)
- 细胞形态:不规则上皮样,贴壁后呈铺路石状,核质比高
- 细胞代数:P5 - P15(建议使用前10代以保证表型稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS + 1%青霉素/链霉素)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(受培养密度及营养条件影响)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基离心后重悬接种
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后直接置于培养箱静置4小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞间隙增大后终止
- 注意事项
- 避免过度消化导致细胞膜损伤
- 传代后6小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO + 90% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→转入液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥85%)
- 功能验证:CCK - 8增殖实验(P8代细胞应保持高增殖活性)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供温度记录证明)
- 到货72小时内证实支原体污染(需提供检测报告)
- 复苏后存活率低于80%(需提供台盼蓝染色结果)
- STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形
- 客户超时复苏(超过72小时未处理冻存管)
- 使用非指定培养基导致细胞形态异常
- 未按规范进行传代(如过度消化或接种密度过低)
- 未定期进行支原体检测引发交叉污染