一、细胞基本属性
细胞名称
人结直肠癌细胞(Human Colorectal Adenocarcinoma Cells)
细胞别称
LOVO Cells;结直肠腺癌细胞;结肠癌上皮细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
成年女性(供体确诊为结直肠腺癌)
组织来源
结直肠腺癌组织原代分离
生长特性
贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态
上皮样多边形,单层铺展呈"铺路石"样紧密排列
细胞代数
P3 - P10(经STR鉴定确保遗传稳定性)
细胞规格
1×10⁵ cells/T25培养瓶或1.2mL冻存管(预充无血清保护液)
培养基
RPMI 1640 + 10% FBS + 1%双抗
培养条件
气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
程序降温冻存液(含7.5% DMSO),液氮气相长期保存
倍增时间
约24 - 48小时(与传代密度正相关)
供应限制
仅供肿瘤机制研究,禁止临床治疗或转基因操作
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:轻摇管壁至冰晶消失,37℃水浴40秒快速复苏
培养瓶:表面消毒后静置4小时再换液
传代标准
融合度达80 - 90%(接触抑制明显时需及时传代)
传代比例
1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法
0.25% Trypsin - EDTA室温消化
显微镜下观察到细胞间隙增大时即刻中和
注意事项
维持高密度培养(低于50%融合度易进入静息期)
传代后6小时补充新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无动物成分冻存液(含人血清替代物)
细胞密度
最佳冻存浓度:5×10⁵ cells/mL
冻存步骤
消化后细胞悬液经300g离心5分钟
程序冷冻仪以-1℃/min速率降温至-80℃
复苏验证
复苏后贴壁率≥85%(12小时观察)
功能验证:CCK - 8法检测化疗药物敏感性(P8代内保持稳定)
四、售后服务承诺
重发标准
1.到货干冰耗尽致细胞失活(需物流温度记录证明)
2.72小时内证实交叉污染(需STR分型报告)
3.原代肿瘤标志物表达缺失(提供qPCR复核结果)
不予重发情形
1.未使用胶原包被培养皿导致贴壁失败
2.自行更改培养基血清浓度引发分化异常
3.未定期进行KRAS基因突变位点验证
4.超过说明书建议的传代次数仍要求质量保证