一、细胞基本属性
- 细胞名称:LNCaP clone FGC人前列腺癌细胞
- 细胞别称:LNCaP - FGC;LNCaP克隆细胞;前列腺癌细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:前列腺癌转移灶(淋巴结来源)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:上皮样多角形,核质比高,贴壁后呈簇状分布
- 细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数范围以维持雄激素受体敏感性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640(含10%FBS+1%丙酮酸钠+10mM HEPES缓冲液)
- 培养条件:气相:5%CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~36 - 48小时(依赖雄激素浓度及培养密度)
- 供应限制:仅限肿瘤机制研究或药物筛选,不可用于临床治疗
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基;培养瓶:酒精擦拭表面后静置4小时再观察贴壁情况
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(雄激素敏感型,需定期检测PSA表达)
- 传代比例:1:3至1:5(建议接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA(含钙离子螯合剂),室温消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁至细胞脱落
- 注意事项:需定期补充5α - 二氢睾酮(维持雄激素受体活性);避免频繁换液(建议每48小时更换50%培养基)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:含血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤:离心后重悬于预冷冻存液,分装至冻存管;程序降温:4℃ 30min→ - 80℃ 24h→液氮长期保存
- 复苏验证:复苏后48小时检测PSA分泌水平(ELISA法);雄激素响应性测试:72小时内应表现AR核转位
四、售后服务承诺
- 重发标准:1. 运输中干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录);2. 7天内证实支原体污染(需提供荧光染色报告);3. 复苏后活率低于85%(需提供台盼蓝染色图像);4. STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形:1. 未使用推荐浓度雄激素导致细胞分化;2. 未定期检测PSA导致表型漂移;3. 擅自改用无血清培养体系;4. 未按规范进行AR功能验证实验
(注:所有操作需遵守生物安全二级实验室规范,细胞特性可能因培养条件存在批次差异)