一、细胞基本属性
细胞名称:LN229人胶质瘤细胞(Human Glioblastoma Cells)
细胞别称:LN229细胞;胶质母细胞瘤细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
组织来源:大脑胶质瘤组织
生长特性:贴壁生长(可形成致密单层或局部重叠生长)
细胞形态:不规则多角形或梭形,核质比高,可见伪足延伸
细胞代数:P3 - P10(建议使用10代以内以维持遗传稳定性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶 或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS + 1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约24 - 48小时(与血清浓度及传代密度相关)
供应限制:仅供体外研究使用,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,置于CO₂培养箱静置4小时再换液
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:3至1:6(推荐初始密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
- 避免消化过度(可能导致细胞团块形成)
- 首次传代后48小时内避免频繁观察扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO + 90%基础培养基)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集细胞,轻柔重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃ 24小时 → 液氮储存
复苏验证:
- 复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:CCK - 8增殖曲线检测(P5代细胞应保持活跃增殖能力)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. 细胞STR分型与数据库不匹配
4. 复苏存活率低于85%(需提供染色检测视频)
不予重发情形:
1. 未按推荐方法进行细胞复苏或传代
2. 使用非指定培养基导致形态异常
3. 未定期进行支原体检测引发交叉污染
4. 液氮保存设备故障导致的细胞失活