一、细胞基本属性
- 细胞名称:KYSE-410人食道鳞状细胞癌细胞
- 细胞别称:KYSE410;食管鳞癌细胞;ESCC细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 疾病背景:源自食道鳞状细胞癌患者原发肿瘤组织
- 组织来源:食道鳞状上皮癌组织(经病理学确认)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:不规则多边形或纺锤形,核质比高,成簇生长
- 细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数以确保表型稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10%胎牛血清+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 增殖特性:倍增时间约36 - 48小时(受血清批次影响)
- 应用限制:限于肿瘤生物学研究,禁止临床治疗或转基因动物构建
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管需37℃水浴快速复苏,离心去除冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶经表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡4小时。
- 传代标准:融合度达80% - 90%时传代(建议每周传代2次)。
- 传代比例:1:3至1:5(接种密度建议2×10^4 cells/cm²)。
- 消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液,37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察到细胞间隙扩大后立即加入含血清培养基终止。
- 关键注意:避免长时间消化导致细胞膜损伤;传代后6小时需补充新鲜培养基;建议定期进行STR鉴定监测交叉污染风险。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础培养基+20%胎牛血清+10% DMSO。
- 冻存密度:推荐1×10^6 cells/mL至5×10^6 cells/mL。
- 程序步骤:细胞消化离心后缓慢加入预冷冻存液,分装至冻存管;采用程序降温盒进行梯度冷冻:4℃ 30分钟, - 80℃过夜,次日转移至液氮气相层。
- 质量验证:复苏存活率需≥85%(台盼蓝法);连续传代后需检测EGFR/TP53基因表达以确认遗传稳定性。
四、售后服务承诺
- 重发条款:
- 细胞到货时干冰完全挥发且温度记录异常,凭开箱视频可申请重发
- 到货72小时内经qPCR证实支原体污染
- STR分型与数据库记录不匹配(需提供第三方检测报告)
- 免责情形:
- 客户自行更换培养基成分导致增殖异常
- 未使用胶原包被培养器皿影响贴壁效率
- 液氮保存中断超过24小时导致细胞失活
- 未按规范进行传代操作引发形态改变